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分子生物学 第 5 章 第 8节：其他分子生物学技术
#分子生物学 #实验技术 #电泳 #WB #蛋白质
这是本章的最后一节~
IMPORTANT
主要内容
本文为第五章第八节“其他分子生物学技术”，聚焦凝胶滞缓技术（EMSA检测DNA-蛋白互作）、蛋白质免疫印迹（Western blotting定量抗原）及细胞定位技术（荧光标记/免疫荧光），补充分子互作与蛋白质分析的关键实验方法。
知识点
EMSA：DNA-蛋白复合物迁移阻滞；游离DNA迁移更快，结合DNA滞后。
Western blotting：SDS-PAGE分离→转膜→一抗/二抗标记→显色定量目标蛋白。
细胞定位：GFP荧光蛋白标记靶蛋白；免疫荧光法通过抗体-荧光染料复合物定位抗原。
评级
难度：🌿🌿
重要性：🌟
AI 辅助说明： 本页摘要由 DeepSeek 辅助生成，需由作者核对；此说明不等同于科学审校记录。
5.8.1 凝胶滞缓技术
- electrophoretic mobility shift assay，EMSA
- 是体外分析 DNA 与蛋白质相互作用而对一种特殊的凝胶电泳技术
- 基本原理：蛋白质与 DNA 结合后将大大增加相对分子质量，而凝胶电泳中 DNA 朝正电极移动的距离与其相对分子质量的对数成反比，因此，没有结合蛋白质的 DNA 片段迁移得快，而与蛋白质结合形成复合物的 DNA 由于受到阻滞而迁移得快
5.8.2 蛋白质免疫印迹技术
- Western blotting
- 原理：被测蛋白质只能与标记的特异性抗体相结合，而这种结合不改变该蛋白质在凝胶电泳中的相对分子质量
- 应用：能被用于测定抗原的相对丰度或与其他已知抗原的关系
5.8.3 细胞定位及染色技术
- 细胞定位最常用的方法：
- 荧光蛋白标记
- 免疫荧光法
第五章 完
TIP
٩(๑˃̵ᴗ˂̵๑)۶ 学累了记得好好歇歇捏~